Tris-HCl和PBS缓冲液的区别和用途是什么?

PBS是pH7.4的磷酸盐缓冲液,PH是固定的,与人体血液等渗,所以一般用于分子克隆及细胞培养实验。

Tris-HCl是用三羟甲基氨基甲烷和盐酸配置,然后可以调节PH,各PH段都有用到,我们做蛋白实验用的较多的是PH6.8和PH8.8的,一般实验室用这个也是在蛋白质、DNA、RNA实验中。

有一段解释:Tris缓冲液不仅被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂,还有许多重要用途。

Tris被用于不同pH条件下的蛋白质晶体生长。

Tris缓冲液的低离子强度特点可用于线虫(C. elegans)核纤层蛋白(lamin)的中间纤维的形成。

Tris也是蛋白质电泳缓冲液的主要成分之一。

此外,Tris还是制备表面活性剂、硫化促进剂和一些药物的中间物。

Tris也被用作滴定标准物。

作为蛋白缓冲液时,若后续工作需要质谱,则不适宜用Tris,最好换成其他质谱仪可耐受的缓冲液。

两者之间有时候也有联用,举个例子:我要提取动物的组织蛋白,开始可能需要用冷PBS缓冲液清洗一下,然后研磨提取蛋白,提取蛋白的裂解液中可能就有Tris-HCl作为缓冲液,此时就不适合用PBS了。,两种缓冲液虽然都很常用,但是本质上还是有些区别的。

  PBS  溶液的PKa值会随着缓冲液的稀释而变化,而且抑制多数酶的活性,包括激酶,磷酸化酶,脱氢酶等。

  Tris  受缓冲液的浓度和使用温度的影响。

可以参与多种酶反应。

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