1.细胞单用Trypsin消化，消化下来的细胞容易成团并且吹打后也不容易成为单细胞，并且消化时间要掌握好，很容易漂起来；
2.用0.25%(w/v)Trypsin-0.53mMEDTAsolution消化，感觉应该在用秒计的时间就消化下来，处理要迅速，我曾经弃Trypsin溶液后，就几乎看不到细胞了，用丁香海豚的0.05%的胰酶+0.01%的EDTA可能是一个比较好的办法；
3.贴壁我也感觉不是特别牢，一般传代后8～10小时贴壁。
瓶子可能是一个问题，我用的是玻璃瓶，也没有另外包被，可能用多聚赖氨酸包被会长得更好。
